DNA ပေါင်းစပ်မှု၏အခြေခံနိယာမ

ဓာတု DNA ပေါင်းစပ်မှုသည် အစိုင်အခဲအဆင့် ပေါင်းစပ်မှုဗျူဟာနှင့် phosphoramidite ဓာတုဗေဒအပေါ် အခြေခံသည်။ဇီဝ DNA ပေါင်းစပ်ခြင်းနှင့် ကွဲပြားသည်၊ ဓာတု DNA ပေါင်းစပ်မှုတွင် ပစ္စည်းသည် DMT (4, 4-dimethoxytrityl) နှင့် phosphoramidite ပြုပြင်ထားသော deoxyriboxyside ဖြစ်သည်၊ ပုံ 1 တွင် ပြထားသည့်အတိုင်း DNA ပေါင်းစပ်မှုကို အစိုင်အခဲအထောက်အပံ့ပေါ်တွင် လုပ်ဆောင်သည် (ကျွန်ုပ်တို့သည် အမျိုးမျိုးသော ကမ်းလှမ်းမှုကို ပေးနိုင်ပါသည်။Oligo Synthesis ကော်လံ) ဆိုလိုသည်မှာ CPG (controlled pore glass) နှင့် PS (polystyrene) တို့ဖြစ်ပြီး ပေါင်းစပ်မှုတစ်ခုလုံးကို တစ်ခုပေါ်တွင် လုပ်ဆောင်သည်။DNA/RNA ပေါင်းစပ်မှုကျွန်ုပ်တို့၏ပင်မစက်ပစ္စည်းဖြစ်သည့် HY Single Channel Synthesizer၊ HY-12၊ HY-192 နှင့် etc၊ ပေါင်းစပ်မှုလမ်းကြောင်းသည် 3' မှ 5' မှဖြစ်ပြီး nucleotide အား တစ်ခုတည်းမှတစ်ဆင့် ခိုင်မာသောပံ့ပိုးမှုဆီသို့ မိတ်ဆက်ပေးပါသည်။ synthesis သံသရာ။ပုံမှန်အားဖြင့် ပေါင်းစပ်မှုစက်ဝန်းတွင် အဆင့်လေးဆင့်၊ Deprotection၊ Coupling၊ Capping နှင့် Oxidation (ပုံ 2) ပါရှိသည်။Deprotection သည် အစိုင်အခဲအထောက်အပံ့ရှိ DMT အုပ်စု သို့မဟုတ် ယခင် nucleoside ရှိ 5' hydroxyl အုပ်စုအား ဖယ်ရှားရန် သတ်မှတ်ထားပြီး၊ dichloroacetic acid တွင် 3% ကို deprotection reagent အဖြစ် အသုံးပြုပါသည်။ထို့နောက် phosphoramidite ပြုပြင်ထားသော deoxyriboxyside ကို activator ၏အကူအညီဖြင့် hydroxyl အုပ်စုကိုထိတွေ့ရန်ခွင့်ပြုခဲ့သည်၊ ဆိုလိုသည်မှာ 5-ethylthiotetrazole သို့မဟုတ် 4, 5-dicyanoimidazole, phosphitetriester (III) ကိုဖွဲ့စည်းပြီး Coupling အဆင့်ကိုနားလည်ခဲ့သည်။မလိုလားအပ်သောချို့ယွင်းချက်အစီအစဥ်များဖြစ်ပေါ်ခြင်းကို လျှော့ချရန် ချိတ်ဆက်မှုအဆင့်တွင် တုံ့ပြန်မှုမရှိသော ဟိုက်ဒရော့စီအုပ်စုကို ပိတ်ဆို့ရန် အဆင့်တစ်ဆင့်ကို လုပ်ဆောင်သည်။နောက်ဆုံးတွင်၊ မတည်ငြိမ်သော phosphitetriester (III) သည် pyridine ၏ပစ္စုပ္ပန်တွင် oxidant အဖြစ် အိုင်အိုဒင်းဖြင့် ဓာတုတည်ငြိမ် phosphortriester (V) အဖြစ်သို့ oxidized သွားသည်။

ပေါင်းစပ်ထားသော DNA သည် aminolysis ဖြင့် ခိုင်မာသော ပံ့ပိုးမှုမှ ခွဲထွက်ခြင်း ဖြစ်နိုင်သည်၊ phosphortriester ပေါ်ရှိ 2-cyanoethyl ကာကွယ်ထားသော အုပ်စုနှင့် nucleobase ရှိ amide တို့သည် တစ်ချိန်တည်းတွင် ကွဲထွက်သွားသည်၊၊ Synthesis Plates နှင့် Synthesis Columns များကို Rack များရှိ ဓါတ်ပြုခန်းတွင် တိုက်ရိုက်ထည့်ထားသည်။ ၏အကာအကွယ်ပစ္စည်း.အကြမ်းထည် DNA ကို ဝယ်လိုအားအရ HPLC၊ electrophoresis နှင့် OPC တို့က ပြင်ဆင်နိုင်သည်၊ ကျွန်ုပ်တို့လည်း သင့်အား ပေးစွမ်းနိုင်ပါသည်။သန့်စင်ရေးကိရိယာPost-processing အတွက်။