ပုံမှန် DNA၊ RNA နှင့် သဘာဝမဟုတ်သော နျူကလိစ်အက်ဆစ်များ ပေါင်းစပ်မှုတွင်၊ Deprotection နှင့် Coupling အဆင့်သည် အရေးကြီးသောအခန်းကဏ္ဍမှ ပါဝင်ပါသည်။
Deprotection အဆင့်သည် အစိုင်အခဲအထောက်အပံ့ရှိ DMT အုပ်စု သို့မဟုတ် ယခင် nucleoside ရှိ အော်ဂဲနစ်အက်ဆစ်ဖြင့် 5' hydroxyl အုပ်စုကို ဖယ်ရှားပြီး အောက်ပါအချိတ်အဆက်အတွက် hydroxyl အုပ်စုကို ဖော်ထုတ်ရန်ဖြစ်သည်။dichloromethane သို့မဟုတ် toluene တွင် 3% trichloroacetic acid ကို အကာအကွယ်ပေးသည့် အဆင့်ကို လုပ်ဆောင်ရန် အများအားဖြင့် အသုံးပြုကြသည်။trichloroacetic acid ၏ အာရုံစူးစိုက်မှုသည် နောက်ဆုံးထုတ်ကုန်များ၏ သန့်ရှင်းမှုကို လွှမ်းမိုးထားသည်။အာရုံစူးစိုက်မှုနည်းခြင်းနှင့် ပိတ်ဆို့ခြင်းအချိန်မလုံလောက်ခြင်းတို့ကြောင့် အထွက်နှုန်းကို ကျဆင်းစေပြီး မလိုလားအပ်သော အညစ်အကြေးများကို တိုးပွားစေသည့် တုံ့ပြန်မှုမရှိသော DMT အုပ်စုကို ချန်ထားခဲ့သည်။ရှည်လျားသော ပိတ်ဆို့ခြင်းအချိန်သည် ပေါင်းစပ်ဖွဲ့စည်းထားသော အစီအစဥ်များ၏ depurine ကို ဦးတည်စေပြီး မမျှော်လင့်ထားသော အညစ်အကြေးများကို ဖြစ်ပေါ်စေသည်။
Coupling အဆင့်သည် ပျော်ဝင်ပစ္စည်းများ၏ ရေပါဝင်မှုနှင့် လေထဲတွင် အစိုဓာတ်ကို အာရုံခံစားနိုင်သည်။ပေါင်းစပ်မှုတွင် ရေ၏အာရုံစူးစိုက်မှုသည် 40 ppm ထက်နည်းသင့်ပြီး 25 ppm ထက် သာလွန်သည်။မဟိုက်ဒရိတ်ပေါင်းစပ်မှုအခြေအနေကို ထိန်းသိမ်းထားရန်၊ nucleic acids ၏ပေါင်းစပ်မှုကို စိုထိုင်းဆနည်းသောပတ်ဝန်းကျင်တွင် လုပ်ဆောင်သင့်သည်၊ ထို့ကြောင့် ကျွန်ုပ်တို့၏ဖောက်သည်များအား အသုံးပြုရန် အကြံပြုအပ်ပါသည်။Amidites ပျော်ဝင်ပစ္စည်းအမှုန့် သို့မဟုတ် အဆီပြန်သော Phosphoramidite ကို လေနှင့် ထိတွေ့ခြင်းမှ ရှောင်ရှားရန် anhydrous acetonitrile တွင် ပျော်ဝင်နိုင်သည်။
phosphoramidites များပျော်ဝင်ခြင်းကြောင့် ရေမဟုတ်သောအခြေအနေတွင် ပိုကောင်းပြီး၊ မော်လီကျူးထောင်ချောက်များသည် ဓာတ်ပစ္စည်းများနှင့် amidite အတွင်းရှိ သဲလွန်စရေများကို စုပ်ယူနိုင်စေရန် ပြင်ဆင်ထားရန် လိုအပ်ပါသည်။မော်လီကျူးထောင်ချောက်များ.50-250ml ဓါတ်ပုလင်းများအတွက် 2 g subsieve၊ 250-500ml ဓါတ်ပုလင်းများအတွက် 5g၊ 500-1000ml ဓါတ်ပုလင်းများအတွက် 10g နှင့် 1000-2000ml ဓါတ်ပုလင်းများအတွက် 20g တို့ကို အကြံပြုထားပါသည်။
phosphoramides များပျော်ဝင်မှုကို ပျော့ပျောင်းသောလေထုအောက်တွင် လုပ်ဆောင်သင့်ပြီး activator reagents နှင့် acetonitrile များကို အချိန်မီပြီးစီးအောင်ပြုလုပ်သင့်သည်။Capping နှင့် Oxidation ဓာတ်ပစ္စည်းများကို တတ်နိုင်သမျှအမြန်ဆုံးအသုံးပြုသင့်သည်၊ အဖွင့်ဓာတ်ပစ္စည်းများသည် သိုလှောင်မှုသက်တမ်းနည်းပြီး ပေါင်းစပ်မှုအတွင်း လုပ်ဆောင်မှုနည်းသည်။
စာတိုက်အချိန်- သြဂုတ်-၀၉-၂၀၂၂